上海遠(yuǎn)慕生物科技是家專業(yè)供應(yīng)進(jìn)口/國產(chǎn)ELISA試劑盒的優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商，專業(yè)提供人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3（VEGFR-3）ELISA試劑盒免費代測，酶聯(lián)免疫試劑盒，白介素試劑盒，金標(biāo)檢測試劑盒，染色試劑盒，生化試劑盒，培養(yǎng)基，抗體，動物血清，標(biāo)準(zhǔn)品，化學(xué)試劑，實驗耗材，細(xì)胞株，其他實驗試劑及實驗品，ELISA種屬涵蓋了科研實驗所需的動植物，咨詢！

    產(chǎn)品中文名：人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3（VEGFR-3）ELISA試劑盒

    產(chǎn)品英文名：Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 3,VEGFR-3 ELISA Kit

    貨號：YM-S0109

    價格：電詢

    運輸方式：快遞發(fā)貨

    檢測標(biāo)本：血清，血漿，尿液，胸腹水，腦脊液，細(xì)胞培養(yǎng)上清，組織勻漿等

    特異性： 可同時檢測天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。

    檢測種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。

    適用范圍：此試劑盒僅用于科研實驗，禁用于臨床

    人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3（VEGFR-3）ELISA試劑盒ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：①標(biāo)本因素；②試劑因素；③操作因素。

   人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3（VEGFR-3）ELISA試劑盒免費代測 檢測包括：

    包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

    1）血清：

    室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

    2）血漿：

    應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

    3）尿液：

    用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

    4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：

    檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/ 分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

    5）組織標(biāo)本：

    切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

     操作注意事項：

    （1）實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

    （2）試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

    （3）使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

    （4）不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

    （5）洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

    （6）使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

    （7）加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

    （8）按照雞血紅蛋白（HB）ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

    （9）底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

    ELISA試劑盒技術(shù)流程：

    雙抗體夾心法（檢測未知抗原）

    1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。

    2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。

    3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

    4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

    5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml

    6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

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