生化試劑常見問題的解決辦法
1 .樣品信息
樣品的溶血、脂血、黃疸等會對測定成果發(fā)生非化學反應的干擾。因此,應根據溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性,采用雙波長或多波長的檢測形式,并在成果核算中扣除因溶血、脂血、黃疸引起的影響,減少干擾程度。
2 .試劑空白
試劑空白吸光度是反映試劑質量的目標。每種試劑都有必定的空白吸光度規(guī)模,試劑空白吸光度的改變往往提示該試劑的變質;有些試劑久置后變渾濁。這些狀況均可使空白吸光度升高。往往需要加大用量,才使“表觀"吸光度上升,將就過試劑空白核對的“關",其成果為如下狀況:
?、倬€性規(guī)模變窄 現象:高值測不高。原因:生產試劑時有效成分投料量缺乏;試劑成份穩(wěn)定性較差。
② 靈敏度變低現象:酶促反應速度曲線斜率下降,測定成果有嚴峻系統(tǒng)誤差。原因:試劑底物濃度缺乏。
?、鄣椭灯?現象:試劑空白的改變曲線(吸光度VS時刻)顯著動搖。原因:試劑自身不穩(wěn)定,自行分解;東西酶純度不夠,雜酶含量超限,導致干擾效果。
3 .測定規(guī)模
每種待測物都有一個可測定的濃度或活性規(guī)模,樣品成果若超越此規(guī)模,分析儀將顯示成果超越規(guī)模的提示。表明試劑現已變質,應更換合格試劑。
4 .底物耗盡
使用連續(xù)監(jiān)測法、兩點法測定酶活性時,若酶活性十分高,底物接近被耗盡,吸光度上升或下降會超越某一吸光度改變規(guī)模,監(jiān)測期的吸光度將偏離線性,使測定成果不可靠。
5 .酶的預活化
測定血清中的某些酶,如CK,離體(采血)后很簡單失活。只有通過適當的還原效果才能重新激活。在AST,ALT采用IFCC推薦辦法測定時需要磷酸吡哆醛預活化。需要強調:含有活化劑的生化試劑,其測定酶活性的成果要高些。
6 .校準與成果溯源性
酶的校對:要滿足在同一辦法學、同一測定條件、與理論核算的FACTOR值差異不大,沒有發(fā)現有顯著影響因素,方可進行校對。