Elisa試劑盒操作過程中注意事項(xiàng)有哪些?
接觸Elisa實(shí)驗(yàn)多年,Elisa試劑盒操作過程復(fù)雜,從樣本收集,實(shí)驗(yàn)操作,加樣,洗滌,孵化都有很多注意事項(xiàng),稍有不慎,將導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗,本章上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司將就elisa試劑盒操作過程中的問題,與大家一起探討。
⑴嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
⑵加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。
(3)封板溫育時(shí),各孔一定要封嚴(yán),防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(4)用洗板機(jī)洗板時(shí),保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(5)合理安排檢測(cè)量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。
(6)加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。
(8)加樣時(shí)保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
(9)應(yīng)保證C清潔,整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。
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